O ciclo evolutivo do agente no hospedeiro invertebrado se realiza no tubo digestivo das fêmeas dos flebotomínios, já que os machos não realizam hematofagia.

O ciclo evolutivo no hospedeiro vertebrado mamífero se realiza nos macrófagos da pele, do sangue, do fígado e do baço.

O exame parasitológico direto com coloração de Giemsa tem alta sensibilidade em lesões recentes e sua positividade é próxima a 100% nas lesões da forma cutânea mucosa e forma mucosa.

A intradermorreação de Montenegro apresenta especificidade próxima de 100% e persiste positiva por anos após a cura da doença, já que reflete resposta de imunidade celular.