A determinação dos níveis basais de ACTH e cortisol e o teste de estimulação rápida pelo ACTH são recomendados se for suspeitada insuficiência adrenal primária a partir da avaliação clínica.

Níveis basais plasmáticos de ACTH acima de 250 pg por mL com níveis séricos de cortisol abaixo de 10 microgramas por dL são diagnósticos de insuficiência adrenal primária.

Na insuficiência adrenal secundária e terciária a produção inadequada de cortisol pode ser devida a um processo destrutivo do eixo hipotálamo-hipófise, resultando numa incapacidade de secretar ACTH ou CRH. Contudo na prática, a causa mais comum de deficiência terciária é a administração farmacológica de glicocorticóides, que suprime a síntese de ACTH.

As características clínicas da insuficiência adrenal secundária e terciária são semelhantes às da insuficiência primária, EXCETO que a hipertensão não está presente e a hipotensão é menos grave.

A deficiência de mineralocorticóides e o excesso de A CTH não são vistos na insuficiência adrenal secundária ou terciária.